Científicos del Centro de Ciencias Pesqueras de Alaska han simplificado un método utilizado para determinar la cantidad de grasa rica en energía en los peces. Como resultado, el número de muestras de peces que ahora pueden analizar ha aumentado sustancialmente.
Los científicos han considerado durante mucho tiempo los lípidos (o grasas) como la reserva de energía más importante para los animales en los ecosistemas marinos. Son más densos en calorías que las proteínas y los azúcares y se utilizan para impulsar el crecimiento. Los peces con valores de lípidos más bajos tienen un crecimiento más lento y un menor potencial reproductivo, y son más débiles en general.
La medición del contenido total de lípidos de los peces se utiliza ampliamente como métrica para comprender la salud y el estado general de una población. Además, las especies de presas con mayor contenido de lípidos contribuyen a la salud general de los depredadores que las comen.
Diferencias con el antiguo método
Los métodos tradicionales para analizar los lípidos llevan mucho tiempo y producen relativamente pocos resultados. En promedio, un técnico puede producir resultados a partir de 15 muestras en un día de 8 horas utilizando análisis gravimétrico. Con el nuevo método, un solo técnico puede producir resultados a partir de 69 muestras en un día de 8 horas. El nuevo método aumenta drásticamente la productividad al tiempo que mantiene una exactitud y precisión muy altas. Es importante que se generen más datos en un plazo de respuesta más rápido para que los responsables de la toma de decisiones informen las evaluaciones de las poblaciones de peces y la gestión de las pesquerías en plazos más ajustados.
Optimización del método para la entrega eficiente de datos
«Los buenos datos sobre las poblaciones de peces requieren grandes tamaños de muestra», señaló Cody Pinger, autor principal y químico analítico del Centro de Ciencias Pesqueras de Alaska. «Y en mi experiencia en la medición de lípidos de peces, los métodos de laboratorio suelen ser lentos y tediosos. Durante casi una década, nuestro grupo ha estado trabajando para optimizar el ensayo de sulfo-fosfo-vainillina, y estoy encantado de decir que hemos aumentado nuestra productividad muchas veces mientras mantenemos una buena exactitud y precisión», manifestó.
El ensayo de sulfo-fosfo-vainillina (SPV) se ha estudiado durante mucho tiempo como una alternativa rápida a los métodos tradicionales para el análisis de lípidos. «Aumentamos la productividad adaptando el ensayo a la instrumentación química moderna, y luego validamos estas mediciones en importantes poblaciones de peces de Alaska», continúo Pinger.
Desarrollo del proceso
El procesamiento de la muestra comienza con un pez. Para algunas especies, todo el pescado se mezcla en una mezcla uniforme; Para otros, solo se procesa el tejido muscular y la muestra se extrae en disolvente orgánico. Los siguientes pasos incluyen calor y ácido sulfúrico concentrado, seguido de una reacción con vainillina en presencia de ácido fosfórico, de ahí el nombre de sulfo-fosfo-vainillina. Este proceso genera un producto final que es un líquido transparente con un tinte rosado. Cuanto más oscuro es el rosa, más lípidos hay en la muestra.
A partir de ahí, la muestra se pasa a través de un espectrofotómetro, que mide la cantidad de luz absorbida por la muestra. Este instrumento afinado puede cuantificar la cantidad de lípidos en cada muestra. El formato de 96 pocillos permite al equipo analizar muchas más muestras a la vez, lo que agiliza el proceso y es más eficiente que los métodos tradicionales.
Calibración y aplicación de los datos
Estudios de investigación anteriores muestran que lograr una alta precisión con este método depende de una calibración adecuada para que pueda aplicarse a una variedad de especies.
La reacción química entre los lípidos, el ácido y la vainillina depende de la composición molecular específica de la grasa, que varía entre las especies de peces. La grasa de un filete de salmón es químicamente diferente de la grasa de un bacalao del Pacífico. En un mundo perfecto, todas las muestras podrían calibrarse utilizando un aceite de pescado ampliamente disponible. En el caso de Pinger y su equipo, utilizaron aceite de menhaden para ese propósito. Sin embargo, esto introduce algún error cuando se analizan muchas especies diferentes con diferentes perfiles lipídicos.
Para afinar los resultados del ensayo SPV utilizando aceite de menhaden para la calibración, el equipo desarrolló modelos de calibración para cada especie analizada: Arenque del Pacífico, Bacalao, Carbonero, Capelán y las cinco especies de salmón del Pacífico de Alaska (chinook, coho, rosado, salmón rojo y chum). Ver estudio
Los resultados produjeron datos que coincidían con los producidos por los métodos tradicionales. Esto validó el método SPV y certificó una nueva forma de medir los lípidos en los peces marinos de Alaska.
Después de muchos años de trabajo, Cody Pinger y su equipo están encantados con los resultados. Pinger expresó que «esto ha estado en proceso durante mucho tiempo, y todos estamos encantados de poder proporcionar datos de alta calidad de una manera tan eficiente. Cuanta más información podamos proporcionar sobre el estado anual de nuestros ecosistemas y poblaciones de peces, mejor será para la gestión de estos recursos marinos de importancia comercial y ecológica».
